Селективные и ростовые среды для выделения легионелл

 




legionella

Селективная среда для культивирования и выделения Legionella pneumophila из природных вод и объектов внешней среды разработана в соответствии со стандартом ИСО 11731. Впервые легионеллы были выделены в 1977г. в Филадельфии. Из 42 видов легионелл наиболее важным является Legionella pneumophila - возбудитель легионеллеза.

 

Принцип действия

Росту легионелл способствуют: активированный уголь, нейтрализует ингибиторы роста бактерий; L-цистеин и
α-кетолутаровая кислота – необходимы для роста легионелл; пирофосфат железа является источником ионов железа; оптимальный рН=6,95 поддерживается ACES-буфером. Сопутствующая микрофлора подавляется глицином и смесью антибиотиков – ванкомицина, полимиксина и цикогексимида.

 

Состав

1) Legionella CYE-Agar Base - основа питательной среды (г/л) – активированный уголь 2,0; дрожжевой экстракт 10,0; агар-агар 12,0;

2) Legionella BCYE-агар включает дополнительно ростовую добавку – ACES-буфер 5,0; пирофосфат железа  0,125; цистеин 0,2; α-кетоглутарат 0,5;

3) Legionella GVPC селективный агар дополнительно включает: глицин 1,5; ванкомицин 0,5; пиолимиксин 40000 ИЕ, циклогекисмид 40 мг


Подготовка образца

Рекомендуется для каждого образца подготовить по 3 чашки селективной агара GVPC. На одну после тепловой обработки образца, вторая – после кислотной обработки, третья – без обработки. При тепловой обработке - 10 мл концентрирован­ного исследуемого материала прогревают на водяной бане при 50оС 30 мин; При подкислении 10 мл образца центрифугируют при 2500 об/мин в течение 20 мин; удаляют супернатант, оставляют около 1 мл; добавляют 9 мл HCl-KCl буфера, рН 2,2.

 

Культивирование

Нанести подготовленный материал 0,1 мл на поверхность селективного агара для легионелл. Инкубировать до 10 дней при 37оС в микроаэрофильных условиях с использованием газогенерирующих пакетов
Anaerocult-C или Anaerocult-C-mini.

 

Учет результатов

Легионелла образует колонии диаметром 2-3 мм серовато-белого цвета. Характерные колонии пересевают на кровяной агар и BCYE-agar с активированным углем и ростовой добавкой. Отсутствие роста на кровяном агаре и наличие слабо прокрашивающихся грамотрицательных палочек на BCYE-агаре указывает на предварительное обнаружение легионелл.

 

Идентификация

Для идентификации колоний необходимо поставить экспресс-тест Duopath-Legionella.

Контроль качества

Тест-штаммы

Рост

Legionella pneumophila ATCC 33216

хороший

Legionella pneumophila ATCC 33823

хороший

Legionella pneumophila ATCC 33152

хороший

Staphylococcus epidermidis ATCC 12228

подавлен

Escherichia coli ATCC 25922

подавлен

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

подавлен

Bacillus cereus ATCC 11778

подавлен

 

 



 

 

ЛАБОРАТОРНОЕ   ОБОРУДОВАНИЕ,   ГИГИЕНИЧЕСКИЙ   КОНТРОЛЬ,
ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ, МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ И ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

 

 

 

Оборудование

Микробиология

Химический анализ

Гигиенический контроль



+7 (495) 782 78 44

info@lab-biomed.ru

Главная О компании Новости Контакты
 

 

 



Каталог питательных сред и оборудования

Новости

18 ноября 2017 г.
"супер-бактерии" наступают.
30 марта 2016 г.
Кишечная палочка весом 665 фемтограмм
5 июня 2015 г.
Билл Гейтс: новая эпидемия может убить 33 млн человек меньше чем за год

[ архив новостей ]

 
 
 

 

 

 
  Copyright "Lab-BioMed", 2006-2012   Все права защищены  
  OOO "Лаб-БиоМед" Телефоны: (495) 782 78 44
E-mail: info@lab-biomed.ru