Комплексная среда для легионелл

 

Legionella Combi Pack

Комплексная среда для легионелл

Кат.N1.10425.0001

(для приготовления 6*500 мл агара)

 

Селективная среда для культивирования и выделения Legionella spр. из биологического материала. В сочетании с подготовкой материала - нагревом или подкислением - эта среда признана лучшей для выделения Legionella pneumophila из природных вод (Dennis с соавт., 1984).

В 1977 г McDade с соавт. выделил бактерию, описанную впервые в связи с эпидемией, случившейся после встречи участников Американского легиона в Филадельфии. Поэтому болезнь назвали легионеллезом ("болезнь легионеров"). Наиболее важным возбудителем легионеллеза среди 33 видов является Legionella pneumophila.

 

Принцип действия

Росту легионелл способствуют следующие вещества:

1.Активированный уголь, который связывает СО2, изменяет поверхностное натяжение и нейтрализует ингибиторы роста;

2.Солянокислый L-цистеин и а-кетоглутаровая кислота используются для образования аминокислот и хелатов соответственно. 3.Пирофосфат железа служит источником ионов железа, а оптимальное значение рН создается ACES-буфером. Сопутствующая микрофлора надежно подавляется глицином и смесью антибиотиков – ванкомицина, полимиксина-В и циклогексимида.

 

Состав (г/л)

1.Агар с активированным углем CYE, основа, для легионелл (г/л), основа: активированный уголь 3,0; дрожжевой экстракт 9,0; агар-агар 13,0.

2.Ростовая добавка BCYE для легионелл (состав на 1 флакон; на 500 мл питательной среды): ACES-буфер 5,0 г; пирофосфат железа 0,125 г; цистеин солянокислый 0,2 г; а-кетоглутарат 0,5 г.

3.Селективная добавка GVPC для легионелл (состав на 1 флакон, на 500 мл питательной среды): глицин 1,5 г; ванкомицин гидрохлорид 0,5 г; полимиксин В-сульфат 39600 ИЕ; циклогексимид 40 мг.

 

Приготовление

Растворить 12,5 г Агара с активированным углем, основы (содержимое одного флакона №1) в 440 мл дистиллированной воды. Автоклавировать 15 мин при 121°С.

Растворить содержимое одного флакона ростовой добавки (флакон №2) асептически в 50мл стерильной воды.

Развести содержимое одного флакона селективной добавки (№3) в 10 мл стерильной дистиллированной воды.

 

Чтобы получить GVPS-селективный агар для легионелл, к основе после ее охлаждения до 45-50°С добавить содержимое обоих флаконов. Хорошо перемешать и заполнить чашки. рН 6,9±0,2 при 25°С.

 

Проведение анализа

Подготовка образца:

Рекомендуется для каждого образца приготовить по 3 чашки: одну после тепловой обработки, одну - после подкисления, одну без какой-либо обработки.

 

Тепловая обработка

10 мл концентрированного исследуемого материала прогреть на водяной бане при 50°С 30 мин.

 

Подкисление

1.Центрифугировать 10мл концентрирован­ного исследуемого материала при 2500 об/мин в течение 20 мин в пробирках с завинчивающейся крышкой.

2.Удалить супернатант, оставив около 1 мл.

3.Добавить 9 мл НСl-КСl-буфера, встряхнуть и дать постоять 5 мин.

НСl-КСl-буфер:

3,9 мл 0,2 М НСl; 25,0 мл 0,2 М КСl; установить рН 2,2 ± 0,2 раствором 1 М КОН.

 

Культивирование

1. Нанести подготовленный материал (0,1 мл) на поверхность готового GVPS-селективного агара для легионелл.

2.Инкубация до 7 дней при 35°С в микроаэрофильных условиях (см. Anaerocult С).

 

Оценка результатов

Легионелла образует колонии диаметром 2-3 мм, серовато-белого цвета. Некоторые штаммы могут быть окрашены в светло-голубой цвет. Предполагаемые колонии пересевают на CASO-агар с добавлением 5% крови барана и агар BCYE с активированным углем и ростовой добавкой. Изоляты, которые не растут на кровяном агаре, слабо окрашивающиеся грамотрицатель­ные палочки могут быть предварительно определены как легионеллы. Для дальнейшей идентификации эти колонии должны быть серологически типизированы.

Контроль качества

Тест-штаммы

Рост единичных колоний

Legionella pneumophila spp. fraseri ATCC 33216

Хороший

Legionella pneumophila ATCC 33823

Хороший

Legionella pneumophila subspp. pneumophila ATCC 33152

Хороший

Staphylococcus epidermidis ATCC 12228

Роста нет / средний

Escherichia coli ATCC 25922

Роста нет / средний

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Роста нет / средний

Bacillus cereus ATCC 11778

Роста нет / средний

Legionella pneumophila

 

 

ЛАБОРАТОРНОЕ   ОБОРУДОВАНИЕ,   ГИГИЕНИЧЕСКИЙ   КОНТРОЛЬ,
ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ, МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ И ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

 

 

 

Оборудование

Микробиология

Химический анализ

Гигиенический контроль



+7 (495) 782 78 44

info@lab-biomed.ru

Главная О компании Новости Контакты
 

 

 



Каталог питательных сред и оборудования

Новости

18 ноября 2017 г.
"супер-бактерии" наступают.
30 марта 2016 г.
Кишечная палочка весом 665 фемтограмм
5 июня 2015 г.
Билл Гейтс: новая эпидемия может убить 33 млн человек меньше чем за год

[ архив новостей ]

 
 
 

 

 

 
  Copyright "Lab-BioMed", 2006-2012   Все права защищены  
  OOO "Лаб-БиоМед" Телефоны: (495) 782 78 44
E-mail: info@lab-biomed.ru